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1、金針菇菌種購置及生產(chǎn)用主要設(shè)施設(shè)備 1.1 主要設(shè)施。接種室、培養(yǎng)室、操作室、貯藏室,其面積大小以生產(chǎn)規(guī)模而定。 1.2 主要設(shè)備。超凈工作臺(tái)(或接種箱)、恒溫箱、操作臺(tái)、轉(zhuǎn)椅、高壓滅菌鍋、常壓滅菌鍋、鋼精鍋、天平、臺(tái)秤、量筒、玻璃瓶、試管等。 1.3 菌種選購。選購優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)、抗逆性強(qiáng)、性狀穩(wěn)定、生長(zhǎng)快、純度高、無雜菌、無病蟲害的優(yōu)良品系。 2、各菌種培養(yǎng)基選擇制作 2.1 母種斜面培養(yǎng)基的制作: 配方①馬鈴薯200--250克,瓊脂20克、白糖20克、水1000毫升、pH值調(diào)至6.5。②馬鈴薯200--250克、瓊脂20克、葡萄糖20克、水1000毫升、pH值調(diào)至6.5。③馬鈴薯200--250克、硫酸鎂5克、白糖20克、維生素B1(B2)100毫升、磷酸二氫鉀2.50克、瓊脂20克、水1000毫升、pH值調(diào)至6.5。 制作:把馬鈴薯切成片放鋼精鍋中煮沸30分鐘,用四層紗布過濾取汁,加入瓊脂及其他料,攪拌溶解后加入糖,再加水至1000毫升,移入培養(yǎng)試管,容量為管長(zhǎng)1/5。 2.2 原種、栽培種培養(yǎng)基的制作: 配方①木屑培養(yǎng)基:闊葉樹木屑73%,蔗糖1%、細(xì)米糠(或麥皮)2.50%、碳酸鈣1%、水料比1:1.20--1.30。 ②棉子殼培養(yǎng)基:棉子殼88%、蔗糖1%、細(xì)末糖(或麥皮)10%,碳酸鈣10%、水料比同①。 ③麥粒培養(yǎng)基:麥粒(或玉米粒也可以)99%碳酸鈣1%,水料比1:1.20。 制作:按上述比例要求稱取各樣配料后混合。糖和化學(xué)物品用水溶化后加入料中拌勻,并將溶化用水量記入水料比中。棉籽殼在混合前拌水預(yù)濕;麥;旌锨敖菰偃脲佒笫欤喳溋2黄贫菫橐,撈出晾干后于其他料混合。全部料混合配好后裝瓶,裝量為瓶容量的1/3。 3、液體菌種制作 配方①葡萄糖3%、玉米粉1%、豆餅粉2%、碳酸鈣0.20%、磷酸二氫鉀0.10%、酵母粉0.50%、硫酸鎂0.05%,將各成分溶于水中混勻,配制成懸浮液,煮沸30分鐘后取上清液定溶,裝入盛有10粒小玻璃珠的500毫升三角瓶中。 配方②馬鈴薯20%、蛋白質(zhì)0.20%、葡萄糖20%、磷酸二氫鉀0.05%、硫酸鎂0.05%、氯化鉀0.01%、馬鈴薯按常規(guī)方法提取濾液,添加其他成分后定溶裝入瓶。 配方③玉米粉5%、酵母粉0.50%、蔗糖4%、碳酸鈣0.20%、VB1毫克、制作方法與配方①相同。 3.1 培養(yǎng)基滅菌與設(shè)施設(shè)備消毒 3.2 母種斜面培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基高壓滅菌用每千方厘米1.10千克,在121℃溫度下滅菌30分鐘,固體菌種培養(yǎng)基在滅菌后立即排放斜面,斜面長(zhǎng)度占試管長(zhǎng)度1/2為宜。 3.3 原種、栽培種培養(yǎng)基。高壓滅菌用每千方厘米1.50千克壓力,在121℃溫度下滅菌1小時(shí)。麥粒為原料的培養(yǎng)基適當(dāng)延長(zhǎng)滅菌時(shí)間。也可用常壓蒸汽滅菌,即在100℃溫度下持續(xù)滅菌8小時(shí)。 3.4 設(shè)施消毒。接種室、培養(yǎng)室、操作室用福爾馬林加熱熏蒸,也可用硫磺粉燃燒熏蒸,用量福爾馬林每立方米空間10毫升,硫磺粉每立方米空間15克;用次氯酸鈣(每千方米20--40克)水溶液,2%--3%來蘇兒噴灑地面和墻壁。 3.5 設(shè)備消毒。超凈工作臺(tái)及其各種工具用70%酒精或5%石碳酸0.25%新潔爾滅浸泡擦洗。接種前,打開紫外線燈滅菌15分鐘。 4、菌種的接種與培養(yǎng) 4.1 母種的接種與培養(yǎng)。接種時(shí)試管(瓶口)朝下并靠近酒精燈火焰處,用接種針把母種試管內(nèi)的菌絲體連同原培養(yǎng)基切成0.50厘米x0.50厘米小塊移入1支新試管培養(yǎng)基斜面上,塞緊棉花,放到23℃恒溫箱或培養(yǎng)室中培養(yǎng)8--10天菌絲即長(zhǎng)滿斜面。 4.2 原種、栽培種的接種與培養(yǎng)。用接種針把母種試管內(nèi)的菌絲體挑取1平方厘米菌種塊接入原種(或栽培種)瓶中的培養(yǎng)基上,同樣瓶口靠近酒精燈火焰處,速度要快。接好后塞上棉花,放到23℃培養(yǎng)室中培養(yǎng)。 4.3 液體菌種的接種與培養(yǎng)在高壓滅菌后的液體培養(yǎng)基內(nèi)接入2平方厘米生長(zhǎng)旺盛的斜面母種一塊,使汽生菌絲的一面向上懸浮于液面,在23℃溫度下靜態(tài)培養(yǎng)2--3天,再置于復(fù)式搖瓶機(jī)(振蕩頻率80--100次/分鐘)上振蕩培養(yǎng)3--4天,當(dāng)液體呈淺黃色、清澈透明、具有香味時(shí),移入消毒后的接種室,在酒精燈火焰口處將液體倒入經(jīng)消毒的栽培種培養(yǎng)基表面,量為每瓶10--15毫升,然后置于23℃氣溫的培養(yǎng)室中培養(yǎng)27天左右即可成為栽培種使用。液體菌種的特點(diǎn)是在原種量小的情況下作為原種使用,采用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)僅需1周左右,比培養(yǎng)固體原種可縮短4倍的時(shí)間,而且菌齡一致,菌絲健狀,生活力旺盛。 5、金針菇菌種的保藏 5.1 低溫保藏。把長(zhǎng)滿斜面的菌種放在4℃冰箱中,每隔5個(gè)月再移植1次。 5.2 常溫保存。用木屑配制的培養(yǎng)基菌絲長(zhǎng)滿后用石臘封閉棉塞,常溫下保存。 5.3 液氮保藏。菌種貯藏在-130-- -193℃的液氮罐內(nèi)。 甘肅省定西地區(qū)農(nóng)業(yè)處 馬驥 摘自于2003年第1期《農(nóng)業(yè)科技與信息》( 佚名)
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