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雖然通過組織分離或孢子培養(yǎng)繁育大球蓋菇菌種技術(shù)業(yè)已成熟,但仍存在菌種培養(yǎng)時間長(一般60天左右)、污染率高等問題。尤其是高溫高濕的南方,有時污染率高達(dá)50%以上,直接造成經(jīng)濟(jì)損失而且影響該品種的規(guī)模化推廣種植。筆者從2000年以來對大球蓋菇制種技術(shù)進(jìn)行了大量的研究和試驗,初步篩選出一套固體培養(yǎng)為原料的制種方法,縮短了制種培養(yǎng)時間,降低污染機(jī)率,并應(yīng)用大規(guī)模生產(chǎn)實踐中取得較好的效果。 一、母種制作技術(shù) 一般處于保存期的大球蓋菇菌種的菌絲處在緩慢生長或停止生產(chǎn)狀態(tài),所以在制作生產(chǎn)用的母種前,必須對保存的菌種進(jìn)行復(fù)壯,以便將處于旺盛生長狀態(tài)的菌種接入母種或原種培養(yǎng)基上,促進(jìn)菌絲快速生長,獲得菌絲粗壯、濃白、生長勢旺的菌種。 1.培養(yǎng)基配方:I號:PDA(馬鈴薯200g、葡萄糖18g、瓊脂18g、水1000m1)。Ⅱ號:PDA+硫酸鎂1.5g+磷酸二氫鉀3g+蛋白胨2g、水1000ml。Ⅲ號:馬鈴薯100g、干雜木屑100g、葡萄糖20g、瓊脂20g、水1000ml。 上述配方的培養(yǎng)基經(jīng)高壓20分鐘滅菌消毒后制成試管斜面,3天內(nèi)用完。 2.制作方法:通過組織分離技術(shù),將選取的大球蓋菇組織塊接入I號培養(yǎng)基上(或接入需復(fù)壯的保存種)。在24--28℃條件下經(jīng)10--15天培養(yǎng),菌絲長至試管1/3--1/4時,挑取菌絲擴(kuò)展前端濃密、粗壯的部分轉(zhuǎn)入Ⅱ號或Ⅲ號培養(yǎng)基上,采用兩點接種法,以使菌絲迅速長滿培養(yǎng)基表面(一般15--20天)提高菌絲的質(zhì)量。經(jīng)Ⅱ號、Ⅲ號復(fù)壯培養(yǎng)基培養(yǎng)的菌絲表現(xiàn)為濃白、粗壯、生命力強(qiáng),以利原種菌絲的生長,縮短原種培養(yǎng)時間,提高成品率。 二、原種及生產(chǎn)種制作 1.配方:I號:小麥或大麥88%、米糠或麥麩10%、石膏或碳酸鈣1%、石灰0.5%、含水量65%(加入米糠或麩皮主要是使培養(yǎng)基疏松,增加透氣性,菌絲走向好)。Ⅱ號:小麥25%、稻草64%、麥麩10%、石膏粉1%、含水量65%--70%。Ⅲ號:雜木屑42%、雜刨木花42%、米糠或麥麩15%、硫酸鎂0.2%、石膏或碳酸鈣1%、含水量70%。 以上配方在1.3--1.5kg/平方米壓力下,消毒2--2.5小時,3天內(nèi)用完。 2.原料選擇和配制:實踐證明:制作大球蓋菇原種和生產(chǎn)種的培養(yǎng)基主原料以麥粒最好,木屑、刨木花次之,稻草最差。 (1)麥粒的選擇:應(yīng)選深黃或暗紅色皮韌性大、浸泡時不易破皮的麥粒為好,從吸水率來看大麥優(yōu)于小麥。 (2)浸泡:浸泡分石灰水浸泡和清水浸泡預(yù)煮后加石灰兩種方法。前者用1%石灰水浸泡,pH值9--10,在25℃小麥浸泡8--9小時,大麥浸泡9--10小時,夏季水溫高應(yīng)適當(dāng)縮短時間。浸泡好的小麥粒,用手指甲掐麥粒凹陷,有較強(qiáng)的彈性,指甲印很快消失為宜。后者用清水先浸麥粒,時間與上相同。浸好的麥粒澇起用清水沖洗后瀝干,放入鍋內(nèi)煮至剛沸為止?jié)称饹鲩_,加入鋪料混合,用0.5%石灰調(diào)pH6.5左右,含水量65%。 (3)裝瓶及消毒:選用容積700ml,瓶口內(nèi)徑為3cm左右的淺白色耐高溫玻璃瓶(不宜用廣口瓶,以免雜菌侵入),將配好混勻的培養(yǎng)料裝入瓶中,每瓶裝200--300g為宜,在1.3--1.5kg/平方米壓力下消毒2--2.5小時,切忌消毒時間過長以免麥粒呈糊狀,導(dǎo)致透氣性和養(yǎng)分下降,影響菌絲生長。 (4)接種和培養(yǎng):采取多點式接種,即在瓶內(nèi)培養(yǎng)料四周按適當(dāng)?shù)木嚯x接種3--4點,料面上再接小塊菌種,在24--28℃條件下,暗培養(yǎng)7--10天,菌絲萌發(fā)生長至直徑4cm左右的菌斑時,立刻對菌絲進(jìn)行人工攪拌,攪拌時接種點的菌絲被攪斷受刺激,同時由于開瓶口(在超凈臺上進(jìn)行)實際上給菌絲起增氧作用,有利于菌絲迅速生長,一般整個培養(yǎng)過程需25--30天可長滿瓶。 3.生產(chǎn)種制作: (1)配方、培養(yǎng)基制作、瓶子選擇和消毒與原種相同 (2)接種:將長滿瓶的原種接種到生產(chǎn)培養(yǎng)基表面上,盡量鋪滿料面,以免雜菌污染,每瓶原種接不超過30瓶生產(chǎn)種,在24--28℃條件下培養(yǎng)7--10天菌絲萌發(fā)生長至潔白、濃密粗壯時,對菌絲進(jìn)行人工攪拌,攪斷菌絲,刺激其快速生長,一般20--25天長滿全瓶。( 佚名)
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